Petunjuk Kit ELISA Monyet Kolagenase I (Kolagenase I).

Perusahaan mengkhususkan diri dalam memasok kit Elisa, jaminan kualitas, konsesi harga, dan dapat menyediakan layanan pengujian gratis, silakan hubungi untuk berkonsultasi!

Kit ini hanya dapat digunakan untuk penelitian ilmiah, bukan untuk diagnosis medis.

Kit Deteksi Kuantitatif Monyet Kolagenase I (Kolagenase I) (ELISA)

panduan pengguna

Nama Kit ELISA Monyet Kolagenase I】

Kit Deteksi Kuantitatif Monyet Kolagenase I (Kolagenase I) (ELISA)

【Penggunaan Kit ELISA Kit Monyet Kolagenase I】

Deteksi kuantitatif serum, plasma dan cairan terkait.

[Prinsip deteksi kit ELISA Monkey Collagenase I (Collagenase I)]

Kit ini menggunakan uji imunosorben terkait enzim sandwich dua langkah (ELISA) antibodi ganda. Tambahkan standar dan sampel uji ke pelat berlapis label enzim bening antibodi monoklonal monyet kolagenase I (Collagenase I) yang telah dilapisi sebelumnya. Setelah inkubasi cukup lama, cuci untuk menghilangkan komponen yang tidak terikat, lalu tambahkan larutan kerja label enzim. Setelah waktu inkubasi cukup, cuci untuk menghilangkan komponen yang tidak terikat. Substrat A dan B ditambahkan secara berurutan, dan substrat (TMB) diubah menjadi produk biru yang dikatalisis oleh horseradish peroxidase (HRP), yang berubah menjadi kuning karena aksi asam. Konsentrasi (Kolagenase I) berkorelasi positif. Nilai OD diukur pada panjang gelombang 450 nm. Berdasarkan nilai OD standar dan sampel, dihitung kandungan kolagenase I monyet (Kolagenase I) dalam sampel.

【Komposisi Kit Kit ELISA Monkey Collagenase I】

1

Pelat berlapis enzim

12 lubang × 8

7

Pengembang Cairan

6mL

2

Standar

0,3mL × 6 tabung

8

Cairan pengembang B

6mL

3

20 kali cairan pencuci pekat

25mL

9

Hentikan solusi

6mL

4

Contoh pengencer

6mL

10

instruksi

1 porsi

5

pengencer khusus

6mL

11

Film penyegel

2 lembar

6

Reagen enzim

6mL

12

tas tertutup

1

[Reagen dan peralatan tidak diperlukan oleh kit ELISA Monkeynase I (Collagenase I)]

1. termostat 37 ℃

2. Pembaca pelat mikro spesifikasi standar

3. Pipet presisi dan ujung sekali pakai

4. Air sulingan

5. Tabung reaksi sekali pakai

6. Kertas penyerap

【Langkah-langkah Kit ELISA Kolagenase Monyet I】

1. Persiapan: Keluarkan kit reagen dari lemari es dan seimbangkan kembali pada suhu kamar selama 30 menit.

2. Larutan pencampur: encerkan larutan pencuci pekat 20 kali lipat dengan air suling ke larutan aslinya.

3. Tambahkan produk dan sampel standar yang akan diuji: ambil pelat berlapis enzim secukupnya dan pasang pada bingkai. Menyiapkan sumur standar, sumur sampel yang akan diuji dan mengosongkan sumur kendali, mencatat posisi masing-masing sumur pada sumur standar. Tambahkan 50μL produk standar; pertama-tama tambahkan 10μL sampel yang akan diuji, lalu tambahkan 40μL pengencer sampel (yaitu, sampel diencerkan 5 kali); sumur kontrol kosong tidak ditambahkan.

4. Inkubasi: Inkubasi dalam penangas air bersuhu 37°C atau termostat selama 30 menit.

5. Cuci piring: buang cairannya, keringkan pada kertas penyerap, isi setiap lubang dengan larutan pencuci, diamkan selama 1 menit, kibaskan larutan pencuci, keringkan pada kertas penyerap, ulangi pencucian sebanyak 4 kali (bisa juga menggunakan mesin cuci untuk menekan Petunjuk mencuci papan).

6. Tambahkan larutan kerja berlabel enzim: tambahkan 50μL larutan kerja berlabel enzim ke setiap sumur, tanpa menambahkan sumur kontrol kosong.

7. Inkubasi: Inkubasi dalam penangas air bersuhu 37°C atau termostat selama 30 menit.

8. Cuci piring: buang cairannya, keringkan di atas kertas penyerap, isi setiap lubang dengan cairan pencuci, diamkan selama 1 menit, kibaskan cairan pencuci, keringkan di atas kertas penyerap, ulangi pencucian piring sebanyak 4 kali (bisa juga menggunakan mesin cuci untuk menekan Petunjuk mencuci papan).

9. Perkembangan warna: tambahkan 50μL larutan pengembang A ke setiap sumur, lalu tambahkan 50μL larutan pengembang B, campur selama 30 detik dengan mixer piring (atau kocok perlahan selama 30 detik dengan tangan), dan hindari pengembangan warna pada 37 ℃ selama 15 menit.

10. Penghentian: Lepaskan pelat label enzim dan tambahkan 50μL larutan penghenti ke setiap sumur untuk menghentikan reaksi (warna berubah dari biru menjadi kuning)

11. Penentuan: Nolkan lubang kosong, dan dalam waktu 15 menit setelah penghentian, ukur serapan (nilai OD) masing-masing sumur dengan panjang gelombang 450 nm.

12. Perhitungan: Berdasarkan konsentrasi produk standar dan nilai OD yang sesuai, hitung persamaan regresi linier dari kurva standar, lalu hitung konsentrasi sampel yang sesuai pada persamaan regresi sesuai dengan nilai OD sampel. Anda juga dapat menggunakan berbagai perangkat lunak aplikasi untuk Perhitungan. Konsentrasi akhir adalah konsentrasi aktual yang diukur dikalikan faktor pengenceran.

[Persyaratan sampel untuk kit ELISA kolagenase I (Kolagenase I) monyet]

1. Sampel tidak boleh mengandung natrium azida (NaN3) karena natrium azida (NaN3) merupakan penghambat horseradish peroxidase (HRP).

2. Spesimen harus diambil sesegera mungkin setelah pengumpulan. Ekstraksi harus dilakukan sesuai dengan literatur yang relevan. Jika pengujian tidak dapat dilakukan segera, spesimen dapat disimpan pada suhu -20 ℃, tetapi pembekuan dan pencairan berulang kali harus dihindari.

3. Sampel harus disentrifugasi sepenuhnya, tanpa hemolisis dan partikel.

【Catatan tentang Kit ELISA Monyet Kolagenase I】

1. Percobaan dilakukan sesuai dengan instruksi, dan hasil percobaan harus ditentukan oleh pembacaan pembaca lempeng mikro.

2. Jika papan berlapis berlabel enzim tidak habis setelah dibuka, papan tersebut harus dimasukkan ke dalam kantong tertutup dan segera ditambahkan pengering.

3. Direkomendasikan agar semua standar, sampel, dan kontrol kosong diuji dalam rangkap dua, dan nilai rata-rata diambil untuk mengurangi kesalahan eksperimen.

4. Perlu diingat bahwa sampel telah diencerkan sebanyak 5 kali. Hasil perhitungan dikalikan 5 untuk mendapatkan konsentrasi sampel sebenarnya.

5. Kisaran kuantitatif kit ini adalah 6,25-200ng/L. Jika melebihi kisaran ini, dihitung dari perpanjangan kurva standar. Ini tidak digunakan untuk hasil kuantitatif yang akurat. ), Dikalikan dengan faktor pengenceran total adalah konsentrasi akhir sampel.

6. Jika warnanya terlalu terang, waktu inkubasi media dapat diperpanjang dengan baik.

7. Untuk menghindari kontaminasi silang, tip, sampel dan kontrol blanko harus diganti dengan yang baru untuk setiap penambahan; komponen umum seperti larutan kerja enzim, pengencer sampel, dan substrat harus dikantilever, dan tidak boleh menyentuh sumur mikro. ; Jangan menggunakan kembali film penyegel.

8. Kit digunakan dalam masa garansi, dan kumpulan reagen yang berbeda tidak boleh dicampur.

9. Substrat B sensitif terhadap cahaya dan menghindari paparan cahaya dalam waktu lama.

[Ringkasan prosedur pengoperasian Kit ELISA Monkey Collagenase I]

Siapkan reagen, sampel dan standar

Tambahkan sampel dan standar yang telah disiapkan, dan bereaksi pada 37 ℃ selama 30 menit

Cuci piring 4 kali, tambahkan reagen enzim, dan bereaksi pada 37 ℃ selama 30 menit

Cuci piring 4 kali, tambahkan larutan pengembangan warna A dan B, dan kembangkan pada suhu 37 ℃ selama 15 menit

Tambahkan solusi penghentian

Baca nilai OD dalam waktu 15 menit

Perhitungan

[Rentang deteksi kit ELISA Monkey Collagenase I (Collagenase I)]

Silakan bertanya

【Spesifikasi Kit ELISA Monkey Collagenase I】

96 porsi/kotak 48 porsi/kotak

[Penyimpanan Kit ELISA Monkey Collagenase I]

Simpan pada suhu 2-8 ℃, terlindung dari cahaya dan kelembapan.

【Validitas Kit ELISA Monkey Collagenase I】

6 bulan